Barvení podle Van Giesona
Aktuální verze stránky ještě nebyla zkontrolována zkušenými přispěvateli a může se výrazně lišit od
verze recenzované 13. března 2020; kontroly vyžadují
2 úpravy .
Van Giesonovo barvení je metoda barvení mikropreparátů v histologii, určená ke studiu struktury pojivové tkáně. Barvivo je směsí kyselého fuchsinu a kyseliny pikrové , přičemž první složka barví kolagenová vlákna do jasně červené barvy a druhá dodává žlutou barvu ostatním tkáňovým strukturám. Zbarvení bylo vyvinuto americkým psychoneurologem a patologem Ira Van Gieson v roce 1889.
Příprava barvicí kompozice
Smíchejte 100 ml nasyceného vodného roztoku kyseliny pikrové a 5 ml 1% kyselého roztoku fuchsinu.
Při dlouhodobém skladování barvivo slábne, v takovém případě se přidá pár kapek čerstvého kyselého fuchsinu.
Algoritmus
- Odstranění parafínu z řezů v xylenu a řezání sestupnými alkoholy do 80% etanolu (možná varianta ošetření: orthoxylen - 2 porce 3-5 minut, 96% etanol - 3 minuty, 90% etanol - 3 minuty, 80% etanol - 3 minuty).
- Barvení Weigertovým hematoxylinem železa po dobu 3–15 minut.
- Několik minut oplachujte v tekoucí vodě.
- Omývání destilovanou vodou.
- Barveno pikrofuchsinem podle Van Giesona po dobu 5 minut.
- Rychlé opláchnutí v destilované vodě (5–15 s).
- Rychlé praní ve dvou dávkách 96% etanolu, jedna dávka absolutního etanolu (nebo karbol-xylenu), čirá ve dvou porcích orthoxylenu. Doba setrvání plátků v každé porci je 1-2 minuty.
- Fixace drogy neutrálním balzámem.
Výsledky
V důsledku barvení se buněčná jádra stanou černými, kolagen - červený, ostatní tkáňové prvky (včetně svalových vláken a erytrocytů) - žlutý, fibrin - žlutý nebo oranžový.
Zdroje
- Jocelyn H. Bruce-Gregorios, MD: Histopatologické techniky, JMC Press Inc., Quezon City, Filipíny, 1974. ISBN 971-11-0853-4
- Pikrofuchsin podle Van Giesona (nepřístupný odkaz) . Archivováno z originálu 15. července 2013. (neurčitý)