Amplifikace (molekulární biologie)

Amplifikace ( lat.  amplificatio  - amplifikace, zvýšení), v molekulární biologii  - proces tvorby dalších kopií úseků chromozomální DNA , zpravidla obsahujících určité geny nebo segmenty strukturního heterochromatinu . Amplifikace může být reakcí buněk na selektivní stimul (například působením methotrexátu ). Amplifikace je jedním z mechanismů aktivace onkogenů během vývoje nádoru, například onkogenu N-myc během vývoje neuroblastomu. Amplifikace je také akumulace kopií specifické nukleotidové sekvence během PCR- polymerázové řetězové reakce [1] .

Proces zdvojení

Izolovaná molekula DNA se zahřeje a poté se rozdělí na dvě vlákna. Přidejte primery . Směs DNA a primerů se poté ochladí. V tomto případě se primery, pokud je požadovaný gen přítomen ve směsi DNA, vážou na její komplementární oblasti. Dále se ke směsi DNA a primeru přidá DNA polymeráza a nukleotidy . Nastavte teplotu optimální pro fungování DNA polymerázy (37 °C). Za těchto podmínek, v případě komplementarity DNA genu a primeru , jsou nukleotidy připojeny na 3' konce primerů, což vede k syntéze dvou kopií genu. Poté se cyklus znovu opakuje, přičemž množství DNA genu se pokaždé zdvojnásobí. Reakce se provádí ve speciálních zařízeních - zesilovačích .

Poznámky

  1. Amplifikace (amplifikace) - Proces tvorby dalších kopií úseků chromozomální DNA, zpravidla obsahujících určité geny nebo segmenty strukturních heterochr ... . Získáno 3. listopadu 2011. Archivováno z originálu 6. ledna 2011.