Chetverin, Alexandr Borisovič
Alexander Borisovich Chetverin (narozený 20. května 1953 ) je ruský molekulární biolog , doktor biologických věd od roku 1995 , profesor molekulární biologie, člen korespondenta Ruské akademie věd v sekci fyzikální a chemické biologie od 30. května 1997 , vedoucí laboratoře biochemie virové RNA v Ústavu proteinů RAS od roku 1998 , student akademika Spirin A.S.
Vědecká činnost
Chetverin pracoval v oblasti genetického inženýrství (vytvoření nového typu vektorů pro klonování matricové ribonukleové kyseliny - mRNA ).
V roce 1991 Chetverin a jeho kolegové vynalezli v Institute of Protein RAS metodu molekulárních kolonií , jejímž podstatou je, že při vytvoření vhodných podmínek se RNA nebo DNA namnoží v gelové vrstvě , díky čemuž se potomstvo každého molekula tvoří kolonii a nešíří se reakčním objemem. Protože gelová matrice zabraňuje konvekci kapaliny v ní obsažené a omezuje difúzi nukleových kyselin , produkty množení se v reakčním médiu nešíří, ale tvoří víceméně kompaktní molekulární kolonie, jako kolonie bakterií rostoucích na povrchu živin. agar. Pokud se propagace provádí v tenké vrstvě gelu, vytvoří se dvourozměrný vzor kolonií, z nichž každá představuje četné kopie ( klony ) jedné původní molekuly RNA nebo DNA.
Metoda molekulárních kolonií umožnila založit zdroj templátů v tzv. „beztemplátové“ syntéze RNA prováděné Qβ-replikázou (RNA-dependentní RNA polymeráza bakteriofága Qβ [1] ) v bezbuněčném systému, a také ke studiu in vitro extrémně vzácných rekombinačních reakcí mezi molekulami RNA, které vedly k objevu schopnosti molekul RNA spontánně přeskupovat své nukleotidové sekvence za fyziologických podmínek . Tyto experimenty poskytují nepřímý důkaz ve prospěch hypotézy světa RNA .
Chetverinova laboratoř také vyvinula řadu praktických aplikací metody molekulárních kolonií, včetně extracelulárního klonování a genového screeningu , stejně jako digitální diagnostiku, která poskytuje spolehlivou detekci jedné molekuly DNA a dvou molekul RNA ve 100 µl plné krve , což umožňuje pro ultracitlivou diagnostiku virových a onkologických onemocnění .
Ceny a ceny
V roce 1995 Chetverin A.B. se stal vítězem Ceny A. N. Belozerského za sérii prací o vytvoření bezbuněčného systému pro replikaci, expresi a klonování RNA.
Publikace
Chetverin A.B. je spoluautorem následujících publikací:
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2002. Přesná diagnóza s molekulárními koloniemi. Molekulární. biologie. 36.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 2003. Překonávání problémů PCR diagnostiky metodou molekulárních kolonií. Molekulární. lék. 2.
- Chetverina E.V., Chetverin A.B. 2008. Nanokolonie: objev, klonování a analýza jednotlivých molekul. Úspěchy biol. chemie. 48.
- Chetverin AB, Chetverina HV 2008. Technika molekulárních kolonií: nový nástroj pro biomedicínský výzkum a klinickou praxi. Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol. 82.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Munishkin AV O povaze spontánní syntézy RNA replikázou Qb // J. Mol. Biol. 1991. V. 222. S. 3-9.
- Chetverina HV, Chetverin AB Klonování molekul RNA in vitro // Výzkum nukleových kyselin. 1993. V. 21. S. 2349-2353. [2] PMID 7685078 .
- Chetverina HV, Demidenko A.A., Ugarov VI, Chetverin AB Spontánní přeuspořádání v sekvencích RNA // FEBS Letters. 1999. V. 450. S. 89-94.
- Munishkin AV, Voronin LA, Ugarov VI, Bondareva LA, Chetverina HV a Chetverin AB Účinné templáty pro replikázu Qb se tvoří rekombinací z heterologních sekvencí. - J. Mol. Biol., 1991, v. 221, str. 463-472.
- Morozov I.Yu., Ugarov VI, Chetverin AB a Spirin AS Synergismus v replikaci a translaci messenger RNA v bezbuněčném systému. - Proc. Natl. Akad. sci. USA, 1993, v. 90, str. 9325-9329.
- Chetverin AB a Kramer FR Oligonukleotidová pole: Nové koncepty a možnosti. - Bio/Technologie, 1994, v. 12, str. 1093-1099.
- Chetverin AB a Spirin AS Replikovatelné RNA vektory: Vyhlídky na bezbuněčnou genovou amplifikaci, expresi a klonování. - Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 1995, v. 51, str. 225-270.
- Chetverin AB, Chetverina HV, Demidenko AA a Ugarov VI Nehomologní rekombinace RNA v bezbuněčném systému: důkaz transesterifikačního mechanismu řízeného sekundární strukturou. – Cell, 1997, v. 88, str. 503-513.
- Chetverin AB a Chetverina HV Metoda pro amplifikaci nukleových kyselin v pevném médiu. US Patent 5, 1997, v. 616, str. 478.
- Chetverin AB Hádanka rekombinace RNA. FEBS Lett., 1999, v. 460, str. 1-5.
- Gmyl AP, Belousov EV, Maslova SV, Khitrina EV, Chetverin AB a Agol VI Nereplikativní RNA rekombinace v polioviru. - J. Virol., 1999, v. 73, str. 8958-8965.
- Vasilyev NN, Kutlubaeva ZS, Ugarov VI, Chetverina HV, Chetverin AB Ribozomální protein S1 funguje jako terminační faktor v syntéze RNA replikázou fága Qβ. - Nat. Communi., 2013, v. 4, číslo článku 1781.
Patenty
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1995. Způsob propagace nukleových kyselin, způsob jejich exprese a médium pro jejich implementaci. RF patent č. 2048522.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. Způsob klonování nukleových kyselin. RF patent č. 2114175.
- Chetverin A.B., Chetverina E.V. 1998. Způsob diagnostiky nukleových kyselin. RF patent č. 2114915.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1997. Metoda pro amplifikace nukleových kyselin v pevném médiu. US Patent 5,616,478.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Metoda amplifikace nukleových kyselin v pevných médiích a její aplikace pro klonování a diagnostiku nukleových kyselin. US Patent 5,958,698.
- Chetverin AB, Chetverina HV 1999. Pevné médium pro amplifikaci a expresi nukleových kyselin jako kolonií. US Patent 6,001,568.
Zdroje