Imunotest

Imunoanalytická metoda (imunochemická zkouška)  je biochemický test, který měří přítomnost nebo koncentraci makromolekul nebo mikromolekul v roztoku pomocí protilátky nebo antigenu.

Molekula nalezená v testu se nazývá analyt a v mnoha případech je to protein. Může však být různých typů a velikostí, pokud si protilátka zachová schopnost rozpoznávat a vázat konkrétní molekulu.

Analyty v biologických tekutinách, jako je sérum nebo moč, se často měří pomocí této metody pro lékařské nebo výzkumné účely.

Imunoanalytická metoda se používá v různých formách: lze ji provádět v případě heterogenních (nebo separativních) testů s několika stupni, přidáním a promýváním činidel nebo jejich separací v různých stupních, nebo v případě homogenních (neseparativních) ) testy, smícháním vzorku s činidly a provedením fyzikálního měření.

Princip

Imunoanalýza se opírá o schopnost protilátky rozpoznat a vázat se na specifickou makromolekulu, která může být komplexní směsí makromolekul. V imunologii se specifická makromolekula vázaná protilátkou nazývá antigen a oblast na antigenu, na kterou se protilátka váže, se nazývá epitop.

V některých případech může být antigen použit v imunotestu k detekci protilátek v roztoku, které tento antigen rozpoznávají. Jinými slovy, v některých imunotestech může být analytem spíše protilátka než antigen.

Kromě vazby protilátky na její antigen je dalším klíčovým rysem všech imunotestů způsob, jakým je získán měřitelný signál v reakci na vazbu. Většina, i když ne všechny, imunotesty zahrnují chemickou vazbu protilátek nebo antigenů na nějakou detekovatelnou značku. V moderních imunotestech existuje velké množství značek a umožňují je detekovat různými způsoby. Mnoho značek je detekovatelných, protože buď emitují záření, nebo způsobují změnu barvy v roztoku, fluoreskují při vystavení světlu nebo mohou vyzařovat světlo.

Poznámky

• Berson SA, Yalow RS, Bauman A., Rothschild MA a Newerly K., Metabolismus inzulínu-I131 u lidských subjektů: demonstrace globulinu vázajícího inzulín v oběhu subjektů léčených inzulínem, Journal of Clinical Investigation, sv. 35, č. 2, 170-190 (1956)
• Yalow RS a Berson SA, Immunoassay of endogenous plasma insulin in man, Journal of Clinical Investigation, sv. 39, č. 7,1157-1175 (1960)
• Yalow RS a Berson SA, Immunoassay of plasma insulin in man, Diabetes, sv. 10, č. 5, 339-344 (1961)
• Wide L. a Porath J., Radioimunoanalýza proteinů s použitím protilátek spojených se Sephadexem, Biochimica et Biophysica Acta - General Subjects, sv. 130, č.p. 1, 257-260 (1966)
• Nakane PK a Pierce GB Jr., Enzyme-značené protilátky pro světelnou a elektronovou mikroskopickou lokalizaci tkáňových antigenů, Journal of Cell Biology, sv. 33, č. 2, 307-318 (1967)
• Avrameas S., Vazba enzymů na proteiny s glutaraldehydem. Použití konjugátů pro detekci antigenů a protilátek, Immunochemistry, sv. 6, č. 1, 43-52 (1969)
• Engvall E. a Perlmann P., Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Kvantitativní stanovení imunoglobulinu G, Immunochemistry, sv. 8, č. 9, 871-874 (1971)
• van Weemen BK a Schuurs AHWM, Immunoassay using antigen-enzyme conjugates, FEBS letters, sv. 15, č. 3, 232-236 (1971)
• van Weemen BK a Schuurs AHWM, Immunoassay using hapten-enzyme conjugates, FEBS letters, sv. 24, č. 1, 77-81 (1972)
• Pittman JA Jr., RIA: Historická poznámka, Clinical Chemistry, sv. 19, č. 7, 793 (1973)
• van Weemen BK a Schuurs AHW M,, Imunotest s použitím konjugátů protilátka-enzym, FEBS letter, sv. 43, č.p. 2, 215-218 (1974)
• Voller A., ​​​​Bidwell DE a Engvall E., Mikrotitrační metoda enzymového imunosorbentního testu a jeho aplikace na malárii, Bulletin Světové zdravotnické organizace, sv. 51, č.p. 2, 209-211 (1974)
• Voller A., ​​​​Bidwell DE a Bartlett A., Enzyme immunoassays in diagnostic medicine, Bulletin of the World Health Organization, sv. 53, č.p. 1, 55-65 (1976)
• Yalow RS, Citation Classic, Current Contents, 14, 98 (1977)
• Yalow RS, Radioimmunoassay: sonda pro jemnou strukturu biologických systémů, Science, sv. 200, č. 4347, 1236-1245 (1978)
• Engvall, E., Citation Classic, Current Contents, 12, 16 (1987)
• Voller A. a Bidwell DE, Better health care with microplate ELISA, Citation Classic, Current Contents, 17, 14 (1989)
• Mujumdar RB, Ernst LA, Mujumdar SR a Wagoner AS, Cyanine dye labelling reagents obsahující isothiokyanátové skupiny, Cytometry, sv. 10, č. 1, 11-19 (1989)
• Yalow RS, Remembrance project: origins of RIA, Endocrinology, sv. 129, č.p. 4, 1694-1695 (1991)
• Engvall E., Pohled na historickou poznámku o EIA/ELISA od Dr. RM Lequin, Clinical Chemistry, sv. 51, č.p. 12, 2225 (2005)
• van Weemen BK, The rise of EIA/ELISA, Clinical Chemistry, sv. 51, č.p. 12, 2226 (2005)
• Lequin RM, Enzyme Immunoassay (EIA)/Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA), Clinical Chemistry, sv. 51, č.p. 12, 2415-2418 (2005)
• Avrameas S., Historické pozadí vynálezu EIA a ELISA, Clinical Chemistry, sv. 52, č.p. 7, 1430-1431 (2006)
• Hammarström S., Berzins K., Biberfeld P., Engvall E., Hammarström M.-L., Holm G., Troye-Blomberg M. a Wahlgren M., Peter Perlmann 1919-2005, Scandinavian Journal of Immunology, sv. 63, č.p. 6, 487-489 (2006)

Poznámky