Iontoměničová chromatografie je speciální případ iontové chromatografie , který umožňuje separovat ionty a polární molekuly na základě nábojů separovaných molekul .
Tento typ chromatografie umožňuje oddělit téměř jakékoli nabité molekuly, včetně: velkých proteinů , malých molekul nukleotidů a aminokyselin . Jako první krok při čištění proteinů se často používá iontoměničová chromatografie .
Pro iontoměničovou chromatografii se používají syntetické polymery, nejčastěji na bázi polystyrenu a polyfenolů. Skupiny odpovědné za procesy iontové výměny jsou nejčastěji zavedeny jako substituenty v benzenovém kruhu monomerů. Komerčně dostupné iontoměničové pryskyřice jsou ve formě malých polymerních kuliček, které je nutné před použitím namočit do vody nebo jiného eluentu [1] . Bobtnání iontoměničové pryskyřice je doprovázeno zvýšením dostupnosti funkčních skupin polymeru v důsledku expanze makromolekul molekulami eluentu, jako při plastifikaci polymeru. Stupeň bobtnání iontoměničové pryskyřice je řízen jak délkou makromolekul, tak stupněm zesítění polymerní matrice.
Iontově výměnná chromatografie odděluje molekuly na základě iontových interakcí . Stacionární fáze má nabité funkční skupiny , které interagují s analyzovanými ionizovanými molekulami opačného náboje. Tato varianta chromatografie je rozdělena do dvou typů - kationtová a aniontová iontoměničová chromatografie:
Chromatofocusing (CF) je metoda iontově výměnné chromatografie založená na eluci s vnitřním (vytvořeným uvnitř kolony) gradientem pH. V současnosti se pro tvorbu pH gradientů používají dvě techniky – „klasická“ chromatofokusace a indukce. CP se obvykle používá k oddělení biologických objektů — proteinů, peptidů, aminokyselin, méně často azobarviv a dalších zwitteriontových sloučenin. Na počátku 90. let 20. století P. N. Nesterenko a A. V. Ivanov navrhli metodu koncentrace a separace přechodných kovů na jedné koloně pomocí techniky chromatofokusace. Tradičně se pro tyto účely vytvářejí na anexových sorbentech sestupné gradienty pH.