Krevní agar

Krevní agar  je obecný název pro živná média obsahující zvířecí krev. Určeno pro izolaci a kultivaci náročných mikroorganismů, jakož i jejich primární diferenciaci podle typu hemolýzy.

Složení a příprava

Krevní agar se připravuje přidáním 5 až 10 % zvířecí krve do sterilního hustého živného média, které bylo roztaveno a ochlazeno na 45-50 °C. Na rozdíl od čokoládového agaru se krev nezahřívá k lýze červených krvinek, takže krevní agar lze považovat za primární médium pro čokoládový agar.

Jako agarové živné médium při přípravě krevního agaru lze použít následující:

• kolumbijský agar (Columbia agar),
• brucellový agar,
• erythritolový agar,
• Givental-Vedmina agar (AGV),
• trypticase soy agar ( trypticase soy agar ),
• mozek srdeční infuzní agar

a další [1] [2] .

Nejčastěji se k přípravě krevního agaru používá defibrinovaná ovčí krev. V závislosti na účelu média a izolovaných mikroorganismů lze použít i krev jiných zvířat, například koně, skotu (krev dobytka), králíka, morčat. Lidská (darovaná) krev se pro přípravu krevního agaru nedoporučuje, protože může obsahovat protilátky, které inhibují růst bakterií [3] .

Hemolýza způsobená mikroorganismy na krevním agaru

V důsledku metabolické aktivity některé mikroorganismy vylučují různé exotoxiny (hemolyziny), které způsobují krevní lýzu (hemolýzu). Charakteristickým rysem krevního agaru je schopnost pozorovat hemolytickou aktivitu mikroorganismů a rozlišovat je podle typu hemolýzy. Hemolýza se dělí na tři typy:

• α-hemolýza (alfa-hemolýza) - dochází k částečné destrukci erytrocytů se zachováním buněčného stromatu, při tomto typu hemolýzy dochází k přeměně hemoglobinu na methemoglobin, díky čemuž živné médium v ​​růstové zóně bakterií získává nazelenalý odstín. Nejčastěji je α-hemolýza způsobena viridujícími streptokoky .
• β-hemolýza (beta-hemolýza) je úplná lýza erytrocytů, při které dochází k odbarvení živného média v růstové zóně mikroorganismu. Tento typ hemolýzy je typický pro stafylokoky , beta-hemolyzující streptokoky, listerie , klostridie a některé další mikroorganismy.
• γ-hemolýza (gama-hemolýza) - nepřítomnost hemolýzy, barva krevního agaru v růstové zóně mikroorganismu zůstává nezměněna [4] .

U některých mikroorganismů se může typ hemolýzy měnit pod vlivem podmínek prostředí. Například pneumokok při kultivaci v přítomnosti kyslíku vytváří na krevním agaru zóny α-hemolýzy, ale k β-hemolýze dochází pod vlivem některých antibiotik nebo při kultivaci za anaerobních podmínek [5] . Clostridium perfringens a některé další mikroorganismy mohou tvořit dvojité zóny hemolýzy [6] .

Aplikace

Krevní agar je jedním ze živných médií, které se povinně používá při diagnostických studiích klinického materiálu [7] .

Krevní agar připravený z Mueller-Hintonova agaru doplněného 5 % defibrinované koňské krve a 20 mg/l NAD se používá k testování antibakteriální citlivosti u bakterií s komplexními nutričními požadavky, jako jsou streptokoky skupiny A, B, C a G, Streptococcus pneumoniae , Haemophilus influenzae , Moraxella catarrhalis aj. [8] .

Viz také

• agar agar
• Živné médium

Poznámky

1. ↑ MUK 4.2.1887-04 Laboratorní diagnostika meningokokové infekce a purulentní bakteriální meningitidy . rospotrebnadzor.ru. Získáno 7. dubna 2017. Archivováno z originálu 1. dubna 2017. (neurčitý)
2. ↑ Atlas, Ronald M., 1946-. Příručka mikrobiologických médií . — Taylor & Francis, 01.01.2010. — ISBN 9781439804087 .
3. ↑ Centra WHO pro kontrolu a prevenci nemocí (USA). Laboratorní metody pro diagnostiku meningitidy způsobené Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae a Haemophilus influenzae: příručka WHO . - 2. - 2011. - 323 s.
4. ↑ Einar Leifson. Typy bakterií na krevním a čokoládovém agaru a bezprostřední příčina těchto typů  // Journal of Bacteriology. - 1932. - T. 24 , čís. 6 . — S. 473–487 . — ISSN 0021-9193 .
5. ↑ Victor Lorian, Bodun Popoola. Pneumokoky produkující beta hemolýzu na agaru  //  Aplikovaná mikrobiologie. - 1972-07-01. — Sv. 24 , iss. 1 . — S. 44–47 . — ISSN 0099-2240 . Archivováno z originálu 6. prosince 2020.
6. ↑ Lékařská mikrobiologie. - M., 1998. - 1200 s. — ISBN 5-88816-048-2 .
7. ↑ Nařízení Ministerstva zdravotnictví SSSR ze dne 22. dubna 1985 N 535 O sjednocení mikrobiologických (bakteriologických) výzkumných metod používaných v klinických diagnostických laboratořích zdravotnických zařízení . lawrussia.ru Získáno 13. 4. 2017. Archivováno z originálu 4. 5. 2017. (neurčitý)
8. ↑ Stanovení citlivosti mikroorganismů na antimikrobiální látky: klinická doporučení . — 2015. Archivováno 18. listopadu 2016 na Wayback Machine