Živné médium

Aktuální verze stránky ještě nebyla zkontrolována zkušenými přispěvateli a může se výrazně lišit od verze recenzované 27. prosince 2021; kontroly vyžadují 6 úprav .

Živné médium  je jednosložkový nebo vícesložkový substrát používaný pro kultivaci mikroorganismů nebo buněčných kultur vyšších organismů.

Požadavky na živná média

Pro většinu patogenních bakterií je optimální slabě alkalické prostředí (pH 7,2-7,4). Výjimkou je vibrio cholerae  - jeho optimum je v alkalické zóně (pH 8,5-9,0) a původce tuberkulózy , který potřebuje mírně kyselou reakci (pH 6,2-6,8). Aby během růstu mikroorganismů kyselé nebo alkalické produkty jejich životně důležité aktivity neměnily pH, musí mít média pufrovací , to znamená, že obsahují látky, které neutralizují produkty metabolismu.

Je žádoucí, aby média byla transparentní  - je pohodlnější sledovat růst kultur, snáze si všimneme kontaminace prostředí cizími mikroorganismy.

Klasifikace

Hustá a polotekutá média se liší od tekutých v přítomnosti želírujícího činidla ( agar-agar , méně často želatina). Kromě toho se jako pevná média používají koagulované vaječné nebo syrovátkové proteiny, brambory a silikagelová média. Některé mikroorganismy používají želatinu jako živinu – jak rostou, médium zkapalňuje.

Příprava médií

Nádobí pro vaření

Nádoby pro přípravu média by neměly obsahovat cizorodé látky, jako jsou alkálie uvolňované některými druhy skla nebo oxidy železa, které se mohou dostat do média při jeho varu v rezavých pánvích. Je lepší používat skleněné, smaltované nebo hliníkové nádobí. Před použitím je třeba nádobí důkladně umýt, opláchnout a osušit. Nové sklo se předběžně vaří 30 minut v 1-2% roztoku kyseliny chlorovodíkové a poté se hodinu oplachuje v tekoucí vodě.

Suroviny

Výchozími surovinami pro přípravu většiny médií jsou produkty živočišného a rostlinného původu a také hotové polotovary.

Kroky vaření

  1. vaření : média se vaří nad otevřeným ohněm, bain-marie , autoklávem nebo vařáky.
  2. Nastavení pH : zhruba provedeno pomocí indikátorového papírku , pro přesné stanovení použijte potenciometr nebo komparátor. Při sterilizaci klesne pH o 0,2, proto se nejprve připraví zásaditější roztok.
  3. vyčeření se provádí, pokud se médium během vaření zakalí nebo ztmavne. K tomu se používá vaječný protein nebo krevní sérum.
  4. filtrace kapalných a roztavených želatinových médií se provádí přes mokré papírové nebo látkové filtry. Filtrace agarových médií je obtížná – rychle tuhnou. Obvykle jsou filtrovány přes bavlněný gázový filtr.
  5. nalijte médium do maximálně ¾ nádoby, protože během sterilizace mohou zátky navlhnout a médium ztratí svou sterilitu.
  6. sterilizace : režim sterilizace závisí na složení média a je uveden v jeho receptu.
  7. řízení

Druhy živných médií

Obrázky

Viz také

Poznámky

  1. ↑ Smirnov A. M. Růst a metabolismus izolovaných kořenů ve sterilní kultuře. M.: Nauka, 1970. 455 s.
  2. ↑ Butenko R.G. Kultura izolovaných pletiv a fyziologie morfogeneze rostlin. M.: Nauka, 1964. 272 ​​s.

Literatura