Místo omezení

Aktuální verze stránky ještě nebyla zkontrolována zkušenými přispěvateli a může se výrazně lišit od verze recenzované 16. března 2013; kontroly vyžadují 2 úpravy .

Restrikční místo (rozpoznávací místo) je krátká sekvence nukleotidů v molekule DNA , která je rozpoznána enzymem restrikční-modifikační endonukleázou ( restrikčním enzymem ). Restrikční enzym se váže na molekulu DNA v místě restrikčního místa a štěpí řetězec nukleotidů v místě nebo v jeho bezprostřední blízkosti.

Restrikční enzymy jsou produkovány bakteriemi v průběhu evoluce, aby zničily cizí DNA, která se může dostat do buňky a způsobit její transformaci. Velikost restrikčního místa různých restriktáz je obvykle 4-6 nukleotidů. Počet bází v místě přímo ovlivňuje jeho frekvenci v genomu. (lze vypočítat na základě předpokladu stejné frekvence výskytu dusíkatých bází) Místa jsou obvykle palindromická, tedy čtená na obou stranách stejně nebo obsahují převrácené repetice. Restrikční místa v DNA samotné bakterie jsou maskována metylací zbytků A a C [1] . To se provádí DNA methyltransferázou, modifikující částí restrikčního-modifikačního komplexu.

Například restrikční enzym EcoRI rozpoznává sekvenci GAATTC s invertovanou repeticí a přerušuje řetězec mezi nukleotidy G a A, přičemž na koncích ponechává překrývající se oblasti AATT [1] .

Celkem bylo v bakteriích různých druhů nalezeno několik stovek restrikčních enzymů. Obrázky níže ukazují restrikční místa a řezné linie nukleotidového řetězce pro několik známých restrikčních enzymů [1] .

Restrikční místa jsou důležitá pro usnadnění inzerce cílových genů do různých konstruktů, jako jsou plazmidy . Charakteristickým znakem plazmidů používaných v genetickém inženýrství je přítomnost polylinkeru, krátkého segmentu s více (asi 20) různými restrikčními místy.

Viz také

Odkazy

Poznámky

  1. 1 2 3 Alberts B., Bray D., Lewis J., Raff M, Roberts C., Watson J. Molecular Biology of the Cell: In 3 vols . - M. : Mir, 1994. - T. 1. - 517 s. — ISBN 5-03-001985-5 .. Archivováno 20. listopadu 2010 na Wayback Machine