Vicia test

Aktuální verze stránky ještě nebyla zkontrolována zkušenými přispěvateli a může se výrazně lišit od verze recenzované 14. května 2012; kontroly vyžadují 3 úpravy .

Vicia test (Vicia test) - rostlinný beta systém[ termín neznámý ] který se používá v genotoxikologických studiích různých faktorů. Je to jeden z 9 hlavních rostlinných genetických testů doporučených Mezinárodním programem Gene-Tox a Světovou zdravotnickou organizací. V tomto testu jsou předmětem studia buňky kořenových meristémů Vicia faba L. ( fazol zahradní ). V současnosti je to jeden z nejpoužívanějších genetických testů na světě [1] [2] [3] .

Charakteristika metody

Aplikace

Od poloviny 20. století se meristémové buňky kořene Vicia faba staly oblíbenými u genetiků a morfologů jako vhodný cytogenetický model. To je způsobeno řadou charakteristik genomu Vicia faba :

  1. malá velikost chromozomů
  2. malý počet chromozomů
  3. vysoký stupeň kondenzace chromatinu, který umožňuje jasně pozorovat všechny fáze mitózy

Vicia test se nejčastěji používá ke sledování mutagenní aktivity vody a půdy přírodního a antropogenního původu. Test se také využívá při studiu genetické bezpečnosti potravinářských přídatných látek, pesticidů, nanočástic, záření a mnoha dalších faktorů [1] .

Specifičnost

Při studiu mutagenního účinku různých faktorů v testu Vicia se používají dvě standardní a univerzální genetické analýzy: antelofázová analýza chromozomových aberací a mikronukleární test (který je nejčastější). Kromě toho lze dynamiku mitotické aktivity studovat na meristémech Vicia faba [2] [1] .

Nastavení experimentu

Pro experimenty se používají vzorky fazolí ze stejné plodiny. Semena se klíčí 5 dní při pokojové teplotě v Petriho miskách s filtračním papírem nebo vatou navlhčenou destilovanou vodou. Když kořeny dosáhnou 5 mm, odstraňte špičku, abyste stimulovali růst sekundárních kořenů. Na konci pokusu se vyberou pouze tři největší sazenice a u každého se změří délka tří nejdelších sekundárních kořenů. Kořeny se poté odříznou a zafixují Clarkovým fixačním prostředkem (1 díl ledové kyseliny octové: 3 díly 96% (100%) ethanolu). Meristémy se obarví 1% ​​acetoorceinem (před barvením lze provést maceraci 1 M HCl při 600 °C po dobu 6 minut) Připraví se lisované přípravky. Pro stanovení frekvence mikrojader se na každém preparátu zkoumá 1000 interfází. Celkem je pro každou skupinu připraveno 6 přípravků. Pro posouzení mitotické aktivity na preparátu se analyzuje 1000 dělících se buněk ve všech fázích mitózy [1] .

Statistiky

Použije se neparametrický Mann-Whitney test a následně Kruskal-Wallisův test.

Viz také

Poznámky

  1. ↑ 1 2 3 4 Anne-Sophie Foltête, Adrien Dhyèvre, Jean-François Ferard, Sylvie Cotelle. Zlepšení Vicia-micronucleus testu pro hodnocení kvality půdy: Návrh na mezinárodní standardizaci: článek. - Chemosféra, 2011. - S. 1624-1629 .
  2. ↑ 1 2 Ma TH Vicia cytogenetické testy na environmentální mutageny. Zpráva americké agentury pro ochranu životního prostředí Gene-Tox Program. - Výzkum mutací, 1982. - S. 257-271 .
  3. ↑ KDO. Pokyny pro krátkodobé testy pro detekci mutagenních a karcinogenních chemikálií: článek. - Ženeva: WHO, 1989. - S. 189 .
 Modelové organismy v biologickém výzkumu