Blotování

Blot (z angličtiny  Blot ) je obecný název pro molekulárně biologické metody pro přenos určitých proteinů nebo nukleových kyselin z roztoku obsahujícího mnoho dalších molekul na nějaký druh nosiče ( nitrocelulóza , PVDF nebo nylonová membrána ) za účelem následné analýzy. V některých případech jsou molekuly předběžně podrobeny gelové elektroforéze , v jiných jsou přeneseny přímo na membránu. Po blotování jsou molekuly vizualizovány pomocí různých metod:

• Barvení (například barvení proteinů stříbrem).
• Autoradiografické zobrazování.
• Specifické značení imunochemickými metodami nebo hybridizací.

Klasifikace

Klasifikace metod podle zkoumané látky:

• Southern blotting je stanovení  sekvence DNA ve vzorku.
• Southwestern blot ( angl.  Southwestern blot ) - stanovení proteinů spojených s DNA.
• Northern blot ( anglicky  Northern blot ) - stanovení sekvence RNA ve vzorku.
• Western blot ( angl.  Western blot ) - stanovení specifických proteinů ve vzorku.
• Eastern blotting ( anglicky  Eastern blotting ) - stanovení posttranslačních modifikací proteinů .

Pojmenování metody

Metoda Southern blotting je pojmenována po autorovi metody Edwinu Southernovi . Zbývající jména byla nejprve neoficiálně dána analogií (příjmení lze přeložit jako „jižní“), poté získala oficiální status [1] . Na rozdíl od ostatních je název „Southern blotting“ velkými písmeny.

Viz také

• Imunochemie
• Elektroforéza v polyakrylamidovém gelu
• Autoradiografie

Poznámky

1. ↑ Murray R., Grenner D., Mace P., Rodwell W. Human Biochemistry. M.: Mir, 1993