Chromatografická kolona - zařízení pro chromatografii , používané jak pro ruční práci, tak jako součást speciální jednotky, chromatografu .
V chromatografické koloně se výchozí vícesložková směs rozdělí na řadu binárních směsí sestávajících z kapaliny nebo nosného plynu (pro plynovou chromatografii ) a jedné ze složek, které se mají oddělit. K separaci může dojít jak v důsledku tvorby dočasných vazeb mezi separovanými látkami a stacionární fází kolony ( adsorpční chromatografie ), tak podle jiných principů (např. vylučovací chromatografie ). Přesněji řečeno, při kalibraci se nastavují hodnoty objemu nebo doby výstupu každé složky z kolony .
Kolona je charakterizována materiálem, ze kterého se skládá stacionární fáze, vnitřním průměrem a délkou. Velikost kolon závisí na množství separovaných látek a typu chromatografie. Na kolonách různých ráží lze oddělit jak mikrogramy, tak kilogramy různých látek.
Existují dva hlavní způsoby plnění kolon pevnými látkami, suché a mokré. V prvním případě je kolona nejprve naplněna suchým práškem, poté prochází mobilní fáze (kapalina nebo plyn). Ve druhém případě je kolona naplněna suspenzí plniva v mobilní fázi. Pokud je mobilní fáze kapalná, pak je třeba v obou případech zajistit, aby v hotové koloně nebyly žádné vzduchové bubliny, které by mohly ovlivnit kvalitu chromatografie nebo ji úplně zablokovat. Kromě toho vždy existuje riziko selhání kolony kvůli nepřípustným látkám (nerozpustné látky nebo příliš aktivní molekuly, které ucpávají kanál kolony), které nejsou eliminovány při přípravě vzorku .
Jako pevnou fázi lze použít materiály jako silikagel , oxid hlinitý , mikrokrystalickou celulózu , agarózu a další materiály, zejména připravené speciálním zpracováním celulózy nebo agarózy pro vylučování velikosti , iontoměničovou nebo afinitní chromatografii .
Při chromatografii jednotlivé složky směsi nanesené na kolonu opouštějí kolonu různou rychlostí. Jsou shromažďovány po frakcích, které určují koncentraci očekávaných látek v každé frakci. Barevné látky jsou vidět i přes skleněné stěny kolony.
| Chemické separační metody | |
|---|---|