| 5-brom-4-chlor-3-indoyl-beta-D-galaktopyranosid | |
|---|---|
| Všeobecné | |
| Systematický název |
5-brom-4-chlor-3-indoyl-beta-D-galaktopyranosid |
| Chem. vzorec | C14H15BrClNO6 _ _ _ _ _ |
| Fyzikální vlastnosti | |
| Molární hmotnost | 408,629 g/ mol |
| Klasifikace | |
| Reg. Číslo CAS | 7240-90-6 |
| PubChem | 65181 |
| Reg. číslo EINECS | 230-640-8 |
| ÚSMĚVY | C1=CC(=C(C2=C1NC=C20[CH]3[C@@H]([C@H]([C@H]([C@H](O3)CO)O)O )O)Cl)Br |
| InChI | InChI=lS/C14H15BrClNO6/c15-5-1-2-6-9(10(5)16)7(3-17-6)22-14-13(21)12(20)11(19)8( 4-18)23-14/h1-3,8,11-14,17-21H,4H2/t8-,11+,12+,13-,14-/m1/s1OPIFSICVWOWJMJ-AEOCFKNESA-N |
| CHEBI | 75055 |
| ChemSpider | 58680 |
| Údaje jsou založeny na standardních podmínkách (25 °C, 100 kPa), pokud není uvedeno jinak. | |
| Mediální soubory na Wikimedia Commons | |
X-gal (také BCIG z anglického bromo-chloro-indolyl-galaktopyranosid ) je organická sloučenina skládající se z galaktózy kombinované s indolem . Je velmi široce používán jako substrát pro beta-galaktosidázy v genetickém inženýrství a molekulární biologii .
X-gal se používá při klonování genů ke stanovení buněčné exprese enzymu p-galaktosidázy kódovaného v genu lacZ .
X-gal je štěpen β-galaktosidázami za vzniku galaktózy a 5-brom-4-chlor-3-hydroxyindolu. Ten se oxiduje na 5,5'-dibrom-4,4'-dichlor-indigo, nerozpustný barevný produkt. X-gal se přidá do Petriho misky nebo kultivační baňky spolu s induktorem p-galaktosidázy, jako je IPTG .
X-gal umožňuje vizuálně určit, které kolonie E. coli byly transformovány požadovaným vektorem. Normálně je v buňkách E. coli enzym kódovaný genem lacZ syntetizován působením induktoru IPTG a modré barvení se ztrácí v buňkách obsahujících geneticky upravený konstrukt, ve kterém je gen lacZ narušen v důsledku genetického vložení.
Gen lacZ lze použít jako reportér , když bakterie nebo kvasinky rostou na médiu obsahujícím X-gal. Když je promotor cílového genu spojen s kódující částí genu galaktosidázy, vazba aktivátorového proteinu na promotor vede k vytvoření barevného produktu štěpení X-gal. [jeden]
X-Gal se používá k detekci E. coli a příbuzných bakterií ve vzorcích vody.