Phosphate buffered saline ( FSB , z anglického Phosphate buffered saline, PBS ) je tlumivý roztok , což je vodný roztok solí obsahující chlorid sodný , hydrogenfosforečnan sodný , chlorid draselný a dihydrogenfosforečnan draselný .
Osmolarita a koncentrace iontů v roztoku obvykle odpovídají koncentracím v lidském těle (tj. tento pufrovací roztok je izotonický ).
Existuje mnoho způsobů, jak připravit fyziologický roztok pufrovaný fosfátem. Některé přípravky neobsahují draslík, jiné obsahují vápník nebo hořčík . [jeden]
| Sůl | mM koncentrace |
Koncentrace g/l |
|---|---|---|
| NaCl | 137 | 8:00 |
| KCl | 2.7 | 0,20 |
| Na2HPO4 _ _ _ | deset | 1.44 |
| KH2PO4 _ _ _ | 1,76 | 0,24 |
| pH | 7.4 | 7.4 |
K přípravě 1 litru jednoduchého fyziologického roztoku pufrovaného fosfátem použijte: [2]
Deset litrů desetinásobného zásobního roztoku PBS lze připravit rozpuštěním 800 g NaCl, 20 g KCl, 144 g Na 2 HPO 4 a 24 g KH 2 PO 4 v osmi litrech destilované vody, čímž se objem dále zvýší na deset litrů. pH výsledného roztoku bude přibližně 6,8, ale po zředění na jeden PBS bude rovné 7,4. Po přípravě roztoku zkontrolujte hodnotu pH pomocí pH metru . V případě potřeby lze pH upravit kyselinou chlorovodíkovou nebo hydroxidem sodným .
Nejjednodušší způsob přípravy fyziologického roztoku pufrovaného fosfátem je použití komerčně dostupných tabletových přípravků. Takové tablety se zředí destilovanou vodou na předem stanovený objem a získá se roztok o předem stanovené koncentraci.
Pro buněčné kultury by měl být roztok rozdělen na alikvoty a sterilizován autoklávováním (20 minut při 121 °C, v kapalném režimu). Sterilizace není nutná, záleží na použití. PBS lze skladovat při pokojové teplotě, ale doporučuje se dlouhodobé skladování nesterilního pufru v chladničce, aby se zabránilo růstu bakterií. Soli v koncentrovaných zásobních roztocích se mohou během chlazení vysrážet, proto se před použitím doporučuje zahřát koncentrovaný roztok na pokojovou teplotu a počkat, až se sraženina úplně rozpustí.
Fosfátovo-solný pufr je široce používán, protože je izotonický a netoxický pro buňky. PBS se používá k rozpouštění látek, proplachování nádob obsahujících buňky a v biologickém výzkumu.