Růstové faktory X a V ( X-faktor a V-faktor, anglicky X-faktor a V-faktor, růstové faktory X a V ) jsou faktory nezbytné pro růst zástupců rodu Haemophilus a některých dalších bakterií na živných půdách . Nejsou to faktory srážení krve , zatímco „X“ a „V“ v názvu jsou latinská písmena , nikoli římské číslice .
Termíny „faktor X“ a „faktor V“ poprvé zavedli Theodor Thjøtta a Oswald Theodore Avery , kteří zjistili, že pro růst bakterie H. influenzae jsou nezbytné dva růstové faktory , z nichž jeden (faktor X) se nachází pouze v krvi a je odolný vůči sterilizaci v autoklávu a druhý („vitamínu podobný“ faktor V) může být přítomen také v jiných substrátech, zejména kvasničném extraktu, odolává varu, ale je zničen autoklávováním [1] .
Faktor X je zobecněný název pro skupinu tetrapyrrolových sloučenin, které tvoří pigmenty obsahující železo (například hemin , hematin). Druhy, které vyžadují růstový faktor X, nejsou schopny syntetizovat protoporfyrin z kyseliny δ-aminolevulové [2] . Faktor X je termostabilní, takže se při sterilizaci v autoklávu nerozkládá.
Zdrojem růstového faktoru X v živném médiu může být krev, včetně lýzy vysokou teplotou ( čokoládový agar ) nebo enzymy [3] , hemoglobin, krystalický hemin nebo hematin.
V-faktor je minimálně ekvivalentní nikotinamid mononukleotidu (NMN) nebo nikotinamid ribosidu (NR), ale běžně se používá nikotinamid adenindinukleotid (NAD) , kde je NAD štěpen bakteriálními cytoplazmatickými enzymy za vzniku NMN nebo NR. Pyridinové sloučeniny, které mohou sloužit jako faktor V, se vyznačují přítomností intaktní pyridin-ribosové vazby v β-konfiguraci a pyridinkarboxamidové vazby v poloze 3 [4] .
Růstový faktor V je termolabilní, tzn. se rozkládá při vysoké teplotě, proto se nenachází v kultivačních médiích nebo substrátech, které prošly sterilizací v autoklávu. Krev nebo krystalický NAD se používá jako zdroj tohoto růstového faktoru při přípravě živných půd. V krvi se V-faktor nachází uvnitř červených krvinek, navíc krev mnoha savců , včetně lidí, obsahuje enzymy , které tento růstový faktor rozkládají , takže běžný krevní agar nepodporuje růst mikroorganismů, které potřebují V-faktor. Pro uvolnění růstového faktoru V z erytrocytů a inaktivaci enzymů se krev zahřívá na teplotu 70–80 °C [5] . Dříve se jako zdroj V-faktoru používaly extrakty z mrkve, brambor, rajčat nebo kvasnic [6] .
V závislosti na potřebě X-faktoru, V-faktoru nebo obou růstových faktorů jsou zástupci rodu Haemophilus zpočátku po izolaci druhově diferencováni.
Pohled | Faktor X | Faktor V |
---|---|---|
H. influenzae | ||
H. influenzae biovar aegypticus | ||
H. haemolyticus | ||
H. parainfluenzae | ||
H. parahaemolyticus | ||
H. paraphrophilus | ||
H. segnis | ||
H. ducreyi |
Potřeba růstového faktoru X u různých typů bakterií může být různá, například růst H. influenzae vyžaduje přidání 0,1 až 10 μg / ml krystalického heminu do živného média a 200 μg / ml pro H. ducreyi . Potřeba V-faktoru se také liší mezi druhy, takže u H. influenzae je potřeba mít krystalický NAD v živném médiu od 0,2 do 1,0 μg / ml, u H. parainfluenzae od 1,0 do 5,0 μg / ml a některé kmeny vyžadují až 25 µg/ml [4] .
Kromě bakterií patřících do rodu Haemophilus mohou být na růstovém faktoru V závislí i další členové Pasteurellaceae , jako jsou některé kmeny Actinobacillus pleuropneumoniae, Avibacterium paragallinarum a Aggregatibacter aphrophilus.