Mykoplazmata | ||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ||||||||||
vědecká klasifikace | ||||||||||
Doména:bakterieTyp:TenerikutyTřída:Mykoplazmata | ||||||||||
Mezinárodní vědecký název | ||||||||||
Mollicutes Edward a Freundt 1967 | ||||||||||
|
Mykoplazmata | |
---|---|
MKN-10 | A49.3 |
MKN-9 | 041,81 |
Mediální soubory na Wikimedia Commons |
Mycoplasma ( lat. Mollicutes ) je třída bakterií , jednobuněčných mikroorganismů [1] [2] , které nemají buněčnou stěnu a které byly objeveny při studiu pleuropneumonie u krav . Mykoplazmata jsou zřejmě nejnízce organizovanějšími samoreprodukujícími se živými organismy, množství jejich genetické informace je 4krát menší než u Escherichia coli .
Mykoplazmata se od ostatních bakterií liší nepřítomností tuhé buněčné stěny (v důsledku čehož je od vnějšího prostředí odděluje pouze cytoplazmatická membrána ) a výrazným polymorfismem .
V kultuře jednoho druhu lze rozlišit velké a malé kulovité, elipsoidní, diskovité, tyčinkovité a vláknité, včetně větvených (proto byla všechna mykoplazmata najednou považována za aktinomycety ) . Jsou také popsány různé způsoby reprodukce: fragmentace, binární štěpení, pučení . Při dělení nejsou výsledné buňky stejně velké, často jedna z nich není ani životaschopná. Mykoplazmata zahrnují formy s nejmenšími známými buněčnými mikroorganismy, včetně těch, které jsou menší než teoretický limit samoreprodukce na živném médiu (tento limit pro kulovité buňky je 0,15-0,20 mikronů a pro vláknité buňky - 13 mikronů na délku při 20 nm v průměru ).
Mykoplazmata jsou schopna růst na široké škále médií : od jednoduchých minerálních po komplexní organické, některé pouze v hostitelském organismu. Metabolické produkty mykoplazmat ( peroxidy , nukleázy , hemolyziny ) mají destruktivní účinek na hostitelskou buňku.
Dříve se věřilo, že mykoplazmata parazitují hlavně na lidech a vyšších zvířatech . Nyní se ukázalo, že rozšíření mykoplazmat v přírodě a ekologická role jsou mnohem širší. Nacházejí se v půdě , uhlí a horkých pramenech , saprotrofy , byly nalezeny symbiotické formy .
Různé druhy jsou buď striktní aerobní nebo obligátní anaeroby
Metody stanovení mykoplazmat se dělí do dvou skupin – kulturní a alternativní. Kultivační metody jsou založeny na kultivaci vzorků biologického materiálu, ve kterých je kontrolována přítomnost mykoplazmat, v selektivní ( syn. elektivní) kapalině a s přídavkem agarových živných médií za aerobních a anaerobních podmínek.
Alternativní metody jsou založeny na polymerázové řetězové reakci (PCR), hybridizaci mykoplazmatické rRNA s fluorescenčně značenými sondami a stanovení aktivity enzymů metabolismu mykoplazmat.
Mykoplazmata jsou náročné mikroorganismy. Mykoplazmata se kultivují na speciálních elektivních (selektivních) bujónových médiích.
Média pro mykoplazmata obsahují různé extrakty a peptony , chlorid sodný , agar se sníženou koncentrací (0,3 % [w/v] polotekutý, kolony ve zkumavkách nebo 1,3 % [w/v] Petriho misky ). Extrakt z hovězího masa, hydrolyzát pankreatu z hovězího srdce ( HRH ) a kasein tedy poskytují zdroje dusíku , uhlíku , vitamínů a aminokyselin a jsou také zdrojem uhlíku. Chlorid sodný udržuje osmotickou rovnováhu v médiu. Nízká koncentrace agaru zajišťuje tvorbu největších (z možných) kolonií. Mykoplazmata prorůstají do tloušťky agaru, vytvářejí kulovité kolonie, které se vyšetřují při malých zvětšeních mikroskopu na Petriho miskách nebo v difuzním světle ve zkumavkách s polotekutým agarem.
Kromě toho se pro kultivaci mykoplazmat do selektivních médií přidávají obohacovací doplňky, jako je kvasinkový extrakt a koňské sérum (1,6–20 % [v/v]). Kvasinkový extrakt je zdrojem prekurzorů nukleových kyselin a koňské sérum je zdrojem cholesterolu , který stimuluje růst mykoplazmat.
Pro expresní kontrolu mykoplazmat v lékařských kontrolních laboratořích se PCR používá hlavně s univerzálními primery pro 23S a 16S rRNA geny mykoplazmat, které mají vysoký stupeň homologie mezi různými typy mykoplazmat. Pro důkladnější studium a kompletní charakterizaci vzorku se používá kultivační metoda v kombinaci s metodou cytoimunofluorescenční mikroskopie a/a indikátorovou (kontrolní) kultivační metodou.
Standardní metoda detekce mykoplazmat v produktech používaných k terapeutickým účelům (proteinová léčiva, vakcíny , sérum ) je kombinací kultivační metody a indikátorové kultivační metody a PCR dosud nebyla schválena jako „standard“. Podle některých odborníků je to způsobeno nemožností analyzovat velkoobjemové vzorky metodou PCR, při které se objem vzorku pohybuje v řádu mikrolitrů (5-15 μl, v závislosti na očekávané koncentraci mykoplazmatické DNA), přičemž kultivační metodu spolu s indikátorovou kultivační metodou lze použít analýzu velkých objemů v řádu mililitrů (např. naočkovat baňku selektivním médiem 10 ml vzorku). Použití velkého objemu je určeno úvahami o citlivosti metody při charakterizaci šarže ( šarže ) léčiva.
Mycoplasma pneumoniae je původcem respirační infekce , tzv. lehké atypické pneumonie . Mycoplasma genitalium může způsobit zánětlivá onemocnění orgánů urogenitálního systému a vést k narušení reprodukční funkce . Pouze tyto dva typy mikroorganismů jsou mykoplazmata patogenní pro člověka [3] .
Většina mykoplazmat je kategorizována jako oportunní patogeny . Často jsou přítomny v genitourinárním systému zdravých mužů a žen, aniž by způsobovaly jakékoli onemocnění. Přesto někteří vědci klasifikují mykoplazmata jako původce sexuálně přenosných infekcí (STI) , i když podle MKN-10 by jako "skutečné" STI měly být klasifikovány pouze následující infekce: gonokokové , chlamydiové , trichomonas , lymfogranulom , chancroid , inguinální granulom , syfilis [3] .
Při diagnostice onemocnění spojených s přítomností mykoplazmat se často používá metoda PCR, která umožňuje detekovat i minimální množství mykoplazmat, ale výsledky samotné metody PCR by neměly být důvodem k aktivnímu terapeutickému působení, protože přítomnost mykoplazmat v urogenitálním systému neznamená vždy povinnou léčbu. V Ruské federaci se hojně využívá také metoda přímé imunofluorescence a kultivační metoda využívající tekuté živné půdy . Obě tyto metody vedou k velkému počtu diagnostických chyb – jak k případům nadměrné diagnózy , tak případům podcenění dostupných mykoplazmat [3] .
V mnoha případech je závěr, že pacient má urogenitální onemocnění způsobené mykoplazmaty a že je potřeba antibiotika , učiněn pouze na základě laboratorních výsledků. Termíny „ ureaplasmóza “ a „mykoplazmóza“ , které v ICD chybí, jsou široce používány jako diagnóza [3] . Existují případy, kdy jsou těhotným ženám předepsána antibiotika v přítomnosti pouze jednoho pozitivního výsledku PCR analýzy (detekce oportunních mikroorganismů - Ureaplasma urealyticum nebo Mycoplasma hominis - bez posouzení kvantitativních parametrů jejich přítomnosti) a / nebo v přítomnosti výsledky sérologického vyšetření [4] .
Nejčastěji jsou v klinickém materiálu získaném z orgánů urogenitálního systému izolovány Ureaplasma urealyticum a Mycoplasma hominis : oba tyto typy mikroorganismů dobře rostou na speciálních živných půdách. K detekci Mycoplasma genitalium se používá analýza PCR nebo jiné molekulárně biologické technologie, protože tento mikroorganismus je obtížně kultivovatelný druh [3] .
Mykoplazmata se vyskytují u 40 % pacientů trpících zánětlivými onemocněními urogenitálních orgánů - jako je uretritida (a pravděpodobně její komplikace: prostatitida , vesikulitida, epididymitida , balanopostitida ), vaginitida , cervicitida , endometritida , salpingo -ooforitida . Spolu s mykoplazmaty jsou u těchto onemocnění detekovány i další mikroorganismy (patogenní a/nebo podmíněně patogenní). Někteří autoři se domnívají, že Ureaplasma urealyticum vede k různým onemocněním urogenitálního systému: negonokoková uretritida , cystitida , zánětlivá onemocnění pánevních orgánů, pyelonefritida , neplodnost , těhotenské komplikace, poporodní a postabortivní komplikace. Ureaplasma urealyticum a Mycoplasma hominis jsou však také detekovány v močové trubici , vagíně a konečníku u 20–75 % zdánlivě zdravých lidí [3] .
Uvádí se nepříznivý vliv genitálních mykoplazmat na výsledek těhotenství, ale řada multicentrických prospektivních studií neprokázala žádný vztah mezi přítomností mykoplazmat v dolním genitálním traktu a nepříznivými výsledky těhotenství. Vliv Mycoplasma genitalium na rozvoj komplikací těhotenství a porodu je sporný : ačkoli existují rozsáhlé prospektivní studie na toto téma, nízká prevalence Mycoplasma genitalium u těhotných žen brání definitivním závěrům o jeho vlivu na průběh a výsledek těhotenství. Ve dvou studiích (jedna z nich zkoumala 915 těhotných žen, druhá 1014) neměla žádná z pacientek, u kterých byla zjištěna Mycoplasma genitalium , nepříznivé výsledky těhotenství. Objasnění etiologické role Mycoplasma hominis , Ureaplasma parvum a Ureaplasma urealyticum ve vývoji nepříznivých výsledků těhotenství je obtížné, protože tato mykoplazmata se zřídka vyskytují v monokultuře a nejčastěji jsou přítomna spolu s bakteriální vaginózou a asymptomatickým bakteriálním a kandidovým nosičstvím . což ztěžuje posouzení jejich skutečného významu [5] .
Diskutabilní je i etiologická role mykoplazmat při vzniku purulentně-septických komplikací časného poporodního období ( pneumonie novorozence) . Zatímco výzkumníci uznávají možné zapojení Ureaplasma spp. v patogenezi intrauterinní pneumonie a chronického plicního onemocnění u předčasně narozených dětí , je třeba poznamenat, že hlavní příčinou bronchopulmonální patologie v těchto případech může být nezralost dýchacího traktu a imunitního systému předčasně narozeného novorozence, v důsledku čehož mikrobiální agens, bez ohledu na stupeň jeho patogenity , může být příčinou a spouštěcím mechanismem onemocnění. Mezi rizikové faktory rozvoje infekčního procesu v tomto případě patří hluboká nedonošenost, morfofunkční nezralost, zhoršená gravidita [5] .
Vzhledem k tomu, že většina genitálních mykoplazmat jsou oportunní mikroorganismy, při zjištění mykoplazmat u pacienta by měl lékař rozhodnout o potřebě léčby v každém případě individuálně. Léčba by měla být předepsána pouze v případě, že existují klinické a laboratorní projevy zánětlivého procesu a byl prokázán etiologický význam mykoplazmat. V tomto případě by měla být nasazena antibiotika [3] .
Kromě identifikace oportunních mykoplazmat je velmi důležité zhodnotit kvantitativní parametry jejich přítomnosti a především klinické projevy infekce. Takže v přítomnosti Ureaplasma urealyticum a Mycoplasma hominis by měla být léčba prováděna pouze tehdy, pokud jsou detekovány v množství větším než 10 4 CFU / ml a jiné patogeny, kromě těchto mykoplazmat, nejsou detekovány a při ve stejnou dobu se konají [3] :